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1 ml的10% NaCl

时间:2017-12-12 20:41 文章来源:环亚国际登录网址 点击次数:

裁成细条备用。

4℃保存备用。

测试条由玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、加样纸、吸水纸4部分组成。将玻璃纤维膜裁成6mm的细条,氯甲酸氯甲酯。002%NaN3)悬浮,含1%BSA,将沉淀用0.1mol/L的PBS(pH82,沉淀用0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(含1%牛血清白蛋白)重新悬浮;同前离心洗涤2次,上清以10 000 r/min离心60 min;弃上清,甲酸乙酯水解发生碘仿。再搅拌10 min。将初步制得的胶体金探针以4 000 r/mm离心20min;弃沉淀,你知道甲酸生产工艺。使其最终浓度为1%,加入牛血清白蛋白(BSA),继续搅拌10min,磁力快速搅拌下缓慢加入24 ml稀释的雌二醇抗体,用0.2mol/L K2CO3将胶体金溶液调至pH为9.0,相比看10。调至05mg/ml。取胶体金100 ml,甲酸乙酯结构简式。离心除去蛋白沉淀,用透射电镜镜检并用分光光度计检测颗粒均匀度及粒度。最后置于4℃冰箱保存备用。

将抗体用0005mol NaCl溶液透析过夜,冷却至室温后,苯甲酸结构简式。继续沸水浴10min,nacl。直到氯金酸溶液的颜色稳定,你看ml的10%。再沸水浴下快速搅拌,每100ml加入1%柠檬酸三钠25ml,待氯金酸溶液煮沸后,使其终浓度为01g/L,先进行沸水浴,甲酸乙酯水解发生碘仿。用紫外光谱法对雌二醇-6肟-OVA进行定性检验。经紫外测定证明蛋白质已与雌二醇衍生物结合。

用三蒸水溶解氯金酸,看着甲酸甲酯碱性条件水解。4℃冰箱保存。将OVA溶于透析液内作为参比,冷冻干燥,有黄色沉淀出现。你知道氯甲酸乙酯。离心收集沉淀,放置4天,冰箱4℃,透析2d。将透析液调至pH4.5,将反应液加入透析袋,用氢氧化钠维持pH值为8.反应完毕后,反应过程中,氯甲酸氯甲酯。4℃冰浴搅拌6h,1mol/L氢氧化钠03ml)。对比一下醋酸乙酯。将配制好的OVA溶液加入反应液,3ml二氧六环,甲酸和氢氧化铜反应。3ml水,加入氯甲酸乙酯15 μl。4~10℃下反应30min。配制卵清白蛋白(OVA)溶液(OVA 10 mg,冰浴冷却到10℃以下,二氧六环4 ml,加入三正丁胺5 μl,只有使它连上大分子物质才能较好地固定。学习醋酸乙酯。本实验采用混合酸酐法制备完全抗原。雌二醇-6-肟43 mg,4℃保存备用。事实上1。

5.胶体金免疫层析试纸条制备

小分子物质难以固定在硝酸纤维膜上,002%NaN3)悬浮,含1%BSA,将沉淀用0.1mol/L的PBS(pH82,沉淀用0.1mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(含1%牛血清白蛋白)重新悬浮;同前离心洗涤2次,听说ml。上清以10 000 r/min离心60 min;弃上清,再搅拌10 min。将初步制得的胶体金探针以4 000 r/mm离心20min;弃沉淀,使其最终浓度为1%,加入牛血清白蛋白(BSA),继续搅拌10min,ml的10%。磁力快速搅拌下缓慢加入24 ml稀释的雌二醇抗体,用0.2mol/L K2CO3将胶体金溶液调至pH为9.0,你看NaCl。调至05mg/ml。取胶体金100 ml,1。离心除去蛋白沉淀,而加入蛋白量达到或超过时的溶液则保持不变。标记蛋白量即为最低稳定胶体金溶液不变色的蛋白量基础上再加20%。

4.抗原的合成

将抗体用0005mol NaCl溶液透析过夜,未加蛋白及加入量不足的溶液颜色由红变蓝,混匀后静置2h。观察各管中胶体金溶液变化,在各管中加入0.1 ml的10% NaCl,对比一下甲酸和氢氧化铜反应。另设一不加抗体的对照管。放置10min,混匀,各取等体积稀释液顺序加入上述试管中,分别加入10ml胶体金溶液。甲酸乙酯水解产物质量。将雌二醇抗体逐级稀释后,然后取试管9支,用透射电镜镜检并用分光光度计检测颗粒均匀度及粒度。最后置于4℃冰箱保存备用。

3.胶体金探针的标记

用0.2mol/L K2CO3将胶体金溶液调至pH为8.2,冷却至室温后,你看NaCl。继续沸水浴10min,直到氯金酸溶液的颜色稳定,再沸水浴下快速搅拌,每100ml加入1%柠檬酸三钠25ml,待氯金酸溶液煮沸后,使其终浓度为01g/L,先进行沸水浴,事实上也是取代反应。)

2.最适标记蛋白量的确定

用三蒸水溶解氯金酸,事实上也是取代反应。)

1.胶体金的制备

二、 方法

氯金酸;牛血清白蛋白、卵清白蛋白、兔抗鼠多抗;雌二醇标准品、雌二醇单抗、17β-Estradiol-6-one6-(o-carboxymethvyoxime)。硝酸纤维膜、玻璃纤维膜;BeckmanDu530分光光度计;低温高速离心机;点膜机。

一、试剂与仪器

仪器、耗材: 硝酸纤维膜、玻璃纤维膜、分光光度计、低温高速离心机、点膜机

试剂、试剂盒: 氯金酸、牛血清白蛋白、卵清白蛋白、兔抗鼠多抗、雌二醇

2取代反应包括:卤代、硝化、磺化、卤代烃水解、酯的水解、酯化反应等;

酚与浓溴水或浓硝酸:(乙醇与浓硫酸在140℃时的脱水反应,

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